Поддержание коротких импульсов в 3P-микроскопии затруднено по двум причинам. Первая - генерация сигнала в 3P-микроскопии пропорциональна обратному квадрату ширины импульса, тогда как генерация сигнала в 2P-микроскопии пропорциональна только обратной ширине импульса. Для генерации достаточного сигнала необходимы очень короткие импульсы ( ~ 40–70 фс) Небольшие изменения ширины импульса оказывают большое влияние на сигнал.